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5XOne-Step RNA TaqMan qPCR Mix

產品編號 產品名稱 規格 價格(元) 說明書
A2302A 5XOne-Step RNA TaqMan qPCR Mix 250T 1000
A2302B 1000T 3200
5XOne-Step TaqMan qPCR Mix是采用TaqMan探針法進行Real-Time PCR的專用試劑,適用于FAM/HEX/TET/JOE等標記探針(本品也適用于Molecular Beacon探針)。其中5XOne-Step TaqMan qPCR Mix將抗體封閉的熱啟動Taq DNA聚合酶、MLV反轉錄酶、Rnase Inhibitor、反應Buffer、dNTP等試劑預混在一起,是一種5×濃度的單組分預混試劑,進行實驗時,PCR反應液的配制十分方便簡單,只需加入引物、探針、模板、水即可。
該預混物中的DNA聚合酶為抗體封閉的熱啟動 Taq DNA 聚合酶,該酶在50℃以下無活性,只有95℃加熱后才能完全恢復酶的活力。以RNA為模板時,在50℃條件進行反轉錄反應,再進行95℃加熱并啟動PCR反應,為一步法qPCR(One Step qPCR)。

組份

名稱 250T×20 μl 1000T×20 μl
5×One-Step RNA TaqMan qPCR Mix 1 ml 1 ml×4
50×ROX Reference Dye 200 μl 200 μl×2

主要特征

  • 熱啟動酶采用抗體封閉,100%熱啟動
  • 單組份預混液,使用方便快捷
  • 高特異性,有效抑制非特異性擴增
  • 高靈敏度,可檢測低豐度基因
  • 適用于所有實時定量PCR儀器
  • 應用

    基因檢測和基因診斷試劑開發。

    注意事項

    1. 5×One-Step RNA TaqMan qPCR Mix于-20℃保存時容易形成沉淀,可用手輕握或室溫放置一段時間后,顛倒混勻待其完全融解后使用。
    2. 本制品請避光保存(短期6個月內使用可置于4℃),使用頻率低時置于-20℃,反復凍融會使制品性能下降。
    3.配制反應液時,注意避免強光照射,并于冰上操作。

    儲存

    1、長期保存,請避光置于-20℃或-70℃可保存3年。
    2、經常使用,融化后可置于4℃,可保存1年。 注:長期-20℃保存可能會出現沉淀,室溫融化后混合均勻,不影響試劑性能。

    實例

    一步法TaqMan qPCR試劑
    Fig. 以A549細胞RNA為模板,將該模板100 ng/μl進行8個2倍稀釋,即模板分別為:50 ng/μl、25 ng/μl、12.5 ng/μl、6.25 ng/μl、3.12 ng/μl、1.5 ng/μl、 0.75 ng/μl、0.38 ng/ul、0.19 ng/μl,每個反應體系加模板2 μl,用5XOne-Step RNA TaqMan qPCR Mix進行擴增檢測,如圖所示,A:本制品在寬廣的模板量區間內具有卓越的線性關系:擴增效率 99.2%,R2 =0.9934。 B:以6.25 ng RNA為模板進行qPCR檢測,共24個重復,由圖可看出重復性良好。C:圖A擴增所得標準曲線。
       
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