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5XHi TaqMan qPCR Mix(UNG)

產品編號 產品名稱 規格 價格(元) 說明書
A2305A 5XHi TaqMan qPCR Mix(UNG) 100T 600
A2305B 500T 2500
由于PCR對核酸的擴增效率極高,在診斷PCR實驗中,非常容易造成移液器、臺面、PCR儀、空氣等氣溶膠污染。當實驗環境被污染后,會導致陰性樣本的假陽性結果。本TaqMan探針法定量試劑中,將dNTP中的dTTP全部更換為dUTP,從而使得擴增后的PCR產物中包含dU堿基。在隨后的實驗中,含有氣溶膠污染的dU PCR產物,將被本試劑中的UNG糖基化酶降解,從而去除了氣溶膠的污染效應,本試劑中的UNG酶在37度孵育2分鐘,即可消除高達10萬個Copy的核酸污染物。因此,本制品是診斷定量PCR檢測的最佳試劑。
5XHi TaqMan qPCR Mix(UNG)將化學修飾的熱啟動Taq DNA聚合酶、UNG酶、反應Buffer、dUTP/NTP Mixture等試劑預混在一起,是一種5×濃度的單組分預混試劑,進行實驗時,PCR反應液的配制十分方便簡單,只需加入引物、探針、模板、水即可。
5XHi TaqMan qPCR Mix(UNG)中的DNA聚合酶為化學法修飾的Hot Start Taq DNA 聚合酶,該酶在50℃以下100%無活性,只有95℃條件下加熱15min后才能完全恢復酶的活力。因此該系統可以有效抑制非特異性PCR擴增,極大的提高了PCR擴增特異性。該試劑盒獨特的反應緩沖液,可在寬范圍中得到良好的擴增結果、檢測靈敏度更高、信號更強。該制品配有單獨的ROX內參染料,使得該試劑可應用于所有RealTime PCR機型。

組分

名稱 100T×20 μl 500T×20 μl
5×Hi TaqMan qPCR Mix(UNG) 0.4 ml 0.4 ml×5
50×ROX Reference Dye 200 μl 200 μl

主要特征

  • 熱啟動酶采用化學修飾,100%熱啟動
  • 引入UNG,可高效消除氣溶膠污染
  • 單組份預混液,使用方便快捷
  • 高特異性,有效抑制非特異性擴增
  • 高靈敏度,可檢測低豐度基因
  • 適用于所有實時定量PCR儀器
  • 應用

    基因檢測和基因診斷試劑開發。

    注意事項

    1.于-20℃保存時容易形成沉淀,可用手輕握或室溫放置一段時間后,顛倒混勻待其完全融解后使用。
    2. 本制品請避光保存(短期6個月內使用可置于4℃),使用頻率低時置于-20℃,反復凍融會使制品性能下降。
    3.配制反應液時,注意避免強光照射,并于冰上操作。

    儲存

    1、長期保存,請避光置于-20℃或-70℃可保存3年。
    2、經常使用,融化后可置于4℃,可保存1年。 注:長期-20℃保存可能會出現沉淀,室溫融化后混合均勻,不影響試劑性能。

    反應實例

    Fig. 以pUC57質粒為模板,將該模板進行8個4倍稀釋,第8個稀釋梯度中模板拷貝數為10copy/μl,用5XHi TaqMan qPCR Mix(UNG)進行擴增檢測,每個反應體系加模板2μl,如圖所示,A:本制品在寬廣的模板量區間內具有卓越的線性關系:擴增效率 97.5%,R2 =0.9995。 B:測試UNG去除DNA污染的能力,向反應體系中加入105copy的含dUTP的PCR產物,分別用普通5xHi TaqMan PCR Mix(B1)和5xHi TaqMan PCR Mix (UNG)(B2)做定量PCR。從圖中可以看出:UNG可很好的去除105copy 的氣溶膠污染。C:圖A擴增的標準曲線。
       
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