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DNA/RNA熱穩定連接酶

產品編號 產品名稱 規格 價格(元) 說明書
D2902A DNA/RNA熱穩定連接酶 10T 300
D2902B 100T 2,000
5’App DNA/RNA熱穩定連接酶來自嗜熱堿甲烷桿菌(Methanobacterium thermoautotrophicum),是RNA連接酶催化亞基的賴氨酸點突變體。該熱穩定DNA/RNA連接酶催化的連接反應不依賴于ATP,但需要5’預腺苷化的接頭才能將其連接到RNA或單鏈DNA 的3’OH末端。該酶也可催化3’端被2’-O-甲基化的RNA和5’預腺苷化接頭的連接反應。連接反應的最適反應溫度為 60-65℃。即使在ATP存在的情況下,該連接酶也不能使RNA或單鏈DNA的5’端磷酸發生腺苷化,因此降低非特異性的串聯和環化。該酶為熱穩定型,最佳反應溫度為 65℃,此溫度下降低了RNA的二級結構,大大提高連接效率。

組分

組分名稱 數量
Thermostable 5’AppDNA/RNA Ligase (20pmol/μl) 50μl
10×App DNA/RNA Ligase Buffer 100μl
50 mM MnCl2 100μl

應用

  • 二代測序文庫構建中連接單鏈DNA和腺苷化的DNA接頭。
  • 構建小RNA二代測序文庫,可在較高溫度下連接預腺苷化的接頭和RNA。
  • 儲存

    -20℃可保存3年。

    使用注意事項

    1. 1× AppDNA/RNA Ligase Buffer:10mM Bis-Tris-Propane- HCl pH 7.0,10mM MgCl2,1mM DTT。
    2. 該酶只能連接5’-端預腺苷化的Oligo接頭到單鏈DNA或RNA的3’-OH基團
    3. 當腺苷化底物的5’-端第一個堿基為“C”時,連接效率較差。
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